Regeneron ISEF 2025 大奖：BMED054 - ARF6 在 RPE 细胞衰老中的作用

年龄相关性黄斑变性（AMD）是一种进行性视网膜退化，会导致严重的中央视力障碍，影响着美国近2000万老年人。视网膜色素上皮（RPE）是位于视网膜和脉络膜之间的支持性单层细胞，其退化和功能障碍在AMD患者中很常见。由于高代谢活性和持续的光照，RPE极易发生氧化应激，而氧化应激是衰老过程中细胞衰老的常见驱动因素。ARF6是一种与神经退行性疾病相关的小单体GTP酶，但其在AMD中的作用尚不清楚。本项目利用体外模型研究了ARF6在氧化应激诱导的RPE细胞衰老中的作用。使用腺病毒载体将野生型（WT）、ARF6Q67L（组成性活性）和ARF6T27N（显性负性）导入ARPE-19细胞。随后，用氧化性过氧化氢处理细胞，模拟人眼衰老。通过对常见的细胞衰老标志物pH2A.X（磷酸化组蛋白2A.X）进行免疫荧光检测，确定衰老程度。结果发现，ARF6Q67L显著增加了pH2A.X的聚焦点数量和信号强度，而ARF6T27N则显著降低了聚焦点数量和总信号强度，这表明ARF6的显性负向活性形式可以拮抗RPE衰老，而ARF6的组成性活性形式可以促进RPE衰老。这些发现表明ARF6的活性会影响氧化应激诱导的RPE细胞衰老，并表明ARF6是未来AMD治疗的潜在治疗靶点。